Dış Kaynaklı Proje Süreçleri Yönetim Sistemi
Arı F. (Yürütücü), Yılmaz V. , Ulukaya E.
Meme kanseri,
Cisplatin, karboplatin, oksaliplatin gibi platin bazlı kemoterapötikler meme kanseri dahil olmak üzere pek çok kanser
türü tedavisinde olumlu sonuçlar veren ajanlardır. Platinli ajanların DNA’da tek ya da çift zincir kırıklarına neden olduğu ve
hücre ölümünü / apoptozisi arttırdıkları bilinmektedir. Bu nedenle bu projede Uludağ Üniversitesi Fen-Edebiyat Fakültesi Kimya
Bölümü tarafından yeni sentezlenmiş platin-bazlı bir ajan olan [Pt(hepy)
kadınlarda en sık görülen tümör türü olup, ayrıca başlıca ölüm nedenidir. Tedavisinde cerrahi girişim ve
radyoterapinin yanı sıra kemoterapi de önemli yer tutmaktadır. Son yıllarda yeni kemoterapötiklerin kullanıma girmesine
rağmen, gene de tam kür (başarılı tedavi) şansı tatmin edici seviyeye gelememiştir. Bu nedenle tedavide başarı oranını
yükseltecek yeni nesil kemoterapötik ajanların/yaklaşımların geliştirilmesi önemlidir.
2Cl2
Tümörler aynı özellikteki tek bir hücre topluluğundan değil, farklı biyolojik özelliklere sahip heterojen hücrelerden
oluşmaktadır. Bu hücreler hiyerarşik bir düzene sahiptir ve bir kısmını kanser kök hücreleri (kanser progenitör/başlatıcı
hücreler) oluşturmaktadır. Kanser kök hücrelerinin farklı hücre tiplerine farklılaşabilme, kendilerini yenileyebilme ve daha da
önemlisi transplante edildikleri organizmada primer tümör fenotipine benzeyen yeni tümörler oluşturabilme özellikleri
bulunmaktadır. Bu en önemli üç özelliğinden dolayı, tümör oluşumu ve gelişiminden (hatta tedavi sonrası gelişen
rekürrenslerden) sorumlu oldukları düşünülmektedir.
] kompleksinin meme kanseri (kanser kök
hücreleri) üzerine olan etkileri değerlendirilecektir.
Bu nedenle, bu çalışmada yeni Pt (II) kompleksinin östrojen reseptörü negatif MDA-MB-231 ve östrojen reseptörü
pozitif MCF-7 hücre soylarından izole edilecek olan kanser kök hücreleri üzerindeki sitotoksik ve olası apoptotik etkileri in vitro
olarak araştırılacaktır. MCF-7 ve MDA-MB-231 meme kanseri hücre soylarından, Pt (II) kompleksinin sitotoksik ve apoptotik
etkilerini incelemek üzere kanser kök hücrelerinin (CD44+ hücreleri) propagasyonunu (hücre soyu içindeki oranının artırılması)
takiben izolasyonu sağlanacak ve testler bu hücreler üzerinde gerçekleştirilecektir. Bu amaçla, Pt (II) kompleksinin farklı
konsantrasyonları (0-50 µM) 24, 48 ve 72 saat boyunca hücrelere uygulanacaktır. IC50, GI50, TGI, LC50 dozları belirlenecektir.
İlk (screening/tarama) sitotoksisite testi olarak MTT yöntemi kullanılacaktır. Fakat lüminesans bir yöntem olduğu için çok daha
hassas olan ATP canlılık testiyle de sonuçlar doğrulanacaktır. Ardından, seçilen dozlarda xCELLigence hücre analiz sistemi ile
sitotoksisite gerçek zamanlı olarak analiz edilecektir. Böylece sitotoksik (sitostatik?) etki potansiyelleri kantite edilmiş olacaktır.
Anlamlı sitotoksik aktivite gösteren dozlarda hücre ölüm modunun ne olduğu (apoptozis veya nekrozis) önce üçlü boyama
(Hoechst/Calcein-AM/propidium iyodür) metoduyla floresan mikroskobu ile morfolojik olarak gösterilecektir. Apoptozis varlığı bir
apoptozis belirteci olan kaspazla kırılmış sitokeratin 18 (M30-Antijen) ile belirlenecektir/doğrulanacaktır. Ayrıca apoptozis
kontrolüyle ilişkili önemli genlerin (FAS, TNFRSF10B, HRK, BCL-2, BAX, CASP3, PTEN, AKT1) ekspresyon seviyeleri
TagMan platformunda RT-PCR ile araştırılacaktır. Tüm çalışmalar klinikte kullanılan platin bazlı ilaçlar olan cisplatin,
karboplatin, oksaliplatin ile de yapılacak ve veriler karşılaştırmalı olarak sunulacaktır